橫紋肌肉瘤超聲診斷比較經濟實惠、比較方便，可以看到腫瘤的部位、數目、大小、形態、邊界以及血供，還能清楚觀察腫瘤的內部結構，故B超使用非常普遍，每年最好檢查一次，但結合術後病理檢查才能最後確診。B超在某些部位肌層、肌肉組織附近可以探到邊界清楚的低迴聲腫塊。內部出血的包塊可能出現強回聲，肢體包塊通常較淺，一般能夠清晰顯示腫瘤內部結構、與周圍軟組織以及骨骼的毗鄰關係。在四肢的腫瘤往往無明顯包膜，邊界不清楚，可以見到類似肌纖維紋理樣的高回聲。

B超除了看周圍的關係、骨頭是否破壞，還可觀察血供、腫瘤信號是否豐富。同時可觀察伴隨症狀，如膀胱橫紋肌肉瘤可能造成泌尿系的阻塞，造成繼發雙側輸尿管擴張、雙側腎積水。膽道橫紋肌肉瘤可能顯示膽總管擴張、肝內膽管或者膽囊擴大，均屬於一些間接徵象。