多數青光眼和眼疲勞的患者均會出現眼睛疲勞症狀，二者區別診斷可以通過測量眼壓得到結果。青光眼患者多數合併有眼壓升高，由於眼壓高而造成眼疲勞、無法長時間看書或出現噁心、嘔吐等情況。而眼疲勞患者也可能會有上述症狀，但不會合並眼壓升高。

此外，對於眼疲勞患者而言，除眼壓不高外臨床還可以檢查調節力是否異常，有無調節過度或調節不足等問題，如有以上情況則通常也會導致患者出現視疲勞。而青光眼患者不僅有眼壓升高表現，還存在前房過淺、視神經改變、視野缺損等症狀，可作為二者鑑別診斷。