螺內酯結構與醛固酮相似，為醛固酮的競爭性抑制劑，可作用於腎臟遠曲小管和集合管，阻斷鈉氫和鈉鉀交換，進而起到阻斷醛固酮的保鈉排鉀作用。由於它僅作用於腎臟遠曲小管以及集合管，對腎小管的其它各段並無作用，所以利尿作用較弱。

另外，螺內酯對醛固酮的其它靶器官也具有一定的作用，可用於對原發性醛固酮增多症的診斷以及治療。同時對其它水腫性疾病、低鉀血癥和高血壓可起到一定的作用。不過螺內酯也具有副作用，如導致男性乳房發育、陽痿、女性月經不調。