梅毒要有明確的不安全的性接觸史，還有孕產婦的梅毒感染史或輸注過血液的輸血史。主要是通過試驗室檢查，可以抽血，如果梅毒抗體陽性，有可能感染過梅毒。還需要做顯微鏡的檢查，可以取可疑的皮損或硬下疳或扁平溼疣，在暗視野顯微鏡下觀察，如果發現可以運動的梅毒螺旋體，就可以作為梅毒的確診依據。

梅毒的血清學檢查，可以通過試驗室檢查梅毒抗體有沒有感染過梅毒，一般感染過梅毒可以出現lgG抗體、IgM抗體。隨著疾病的發展，lgG的抗體會出現緩慢的上升。所以還有腦脊液的檢查，如果梅毒患者出現神經症狀，可以通過檢查腦脊液，有利於診斷梅毒。