乙肝疫苗第二針和第一針間隔的時間是28天以上。乙肝疫苗規範的注射方法是三針注射方法，分別在0、1、6個月注射。對於成人注射20μg的重組酵母乙肝疫苗，對於兒童注射10μg的重組酵母乙肝疫苗。

第一針注射完以後要間隔28天以上注射第二針乙肝疫苗，注射完第二針乙肝疫苗以後，第三針乙肝疫苗和第一針的乙肝疫苗要間隔6個月。通過這樣的注射就可以獲得非常好的免疫力。一般會有80%-90%注射過疫苗的人產生有效的乙肝病毒的表面抗體。

一般在注射完第三針乙肝疫苗以後1-2個月就會產生有效水平的表面抗體，建議注射完乙肝疫苗第三針以後1-2個月，化驗乙肝病毒表面抗體的水平，確定是否達到了有效的保護水平。